Протокол Microarray ДНАА
Протоколы Microarray ДНАА
|
ДНАО Microarray Bioinformatics |
Выучьте о обломоках ДНАА |
Поставщики и продукты Microarray ДНАА |
Форум Блока ДНАА |
Весточка Microarray ДНАА |
Основной Протокол Microarray ДНАА:
Этапы в эксперименте по Microarray:
1. Получите Обломок Microarray ДНАА
В настоящее время, над 50.000 ДНААМИ зонды можно запятнать на скольжение 25X75mm робототехнический печатать. Таким образом по возможности одеть весь людской комплимент генома использующ этот high-density подход к блока (например блоки Affymetrix).
Тысячи определенных пятен знанных oligos или DNAS напечатаны на платформах матрицы расположенных на или кремнии, nylon листах, или стеклянных скольжениях.
2. Обозначать Cy3 и Cy5 образцов RNA использующ синтез ДНАА (RT-PCR)
RNA от 2 или больше образцов сравнен. Транскрибированный RNA от каждого образца обратными использующ RT-PCR к ДНАУ (комплементарному ДНАУ). ДНАО обозначено с 2 по-разному дневными красками покрашены по-разному (красно и зелено), с Cy3 и Cy5.
3. Гибридизация зондов ДНАА к блоку ДНАА
Зонды ДНАА гибридизированы к ДНАУ microarray. Блок ДНАА после этого помыт.
4. Обнаружение сигнала гибридизации
Просмотрены и обнаружены дневные сигналы гибридизации использующ приспособления лазера confocal. Данные фильтрованы и после того как я обработаны.
5. Анализ информации Microarray ДНАА
Дирижирован анализ информации использующ инструменты Microarray ДНАА bioinformatic and/or средство программирования обработкаа изображений.
Intesities сигнала пятен сопоставлены с концентрацией образцов mRNA цели. Минирование данных также дирижировано использующ статистически программы и алгоритмы для того чтобы обусловить если вверх-otregulirovan ген интереса, после того как онotregulirovan, или неизменно.
Данные после этого организованы использующ базу данных. Приписку гена можно после этого выполнить на данных, с ИДЕТ (анализ ontology гена), анализа путем разбиения на группы (котором гены и pathways групп подобные совместно), и анализе pathways и сетях генов.