Proteina Microarrays
Visiti la stazione molecolare per un articolo grande sull'anticorpo e sulla proteina Microarrays
Circuiti integrati Della Proteina:
La proteina Microarrays può essere basata su tutta l'analisi ligand-legantesi che conta sulla formazione del prodotto con una molecola immobilizzata di bloccaggio e una molecola dell'obiettivo presenti nella soluzione. Queste analisi possono essere miniturized e disposto su un circuito integrato microarray della proteina.
I microarrays della proteina ora stanno transformandosi in in molto popolare dovuto le loro applicazioni future possibili nello studio su acido-proteina, su proteina-proteina, sul ligand-ricevitore, sull'obiettivo della droga-proteina e sulle interazioni nucleici di enzima-substrato.
Tipi di molecole di bloccaggio per i circuiti integrati di Microarray della proteina. Per analizzare le interazioni della proteina con altre molecole, i microarrays della proteina possono avere vari tipi di molecole immobilizzate sulla superficie dello scorrevole per fungere da molecole di bloccaggio nell'analisi microarray della proteina.
Figura 1 illustra l'allineamento della proteina più comune, l'anticorpo microarray. Gli anticorpi sono macchiati su una lastra di vetro. Due lysates delle cellule con le proteine identificate con Cy3 e Cy5 (per esempio, cancro contro il normale) sono aggiunti come soluzione sull'allineamento della proteina. I segnali sono rilevati dai due segnali differenti. I dati sono computati permettendo un'analisi di quanto ting-ha identificato la proteina che gli anticorpi su ogni punto stanno legandosi. Queste informazioni permettono che si determini se l'espressione della proteina in su-sia regolata in cancro, giù-regolato o identicamente.
Figura 2. a) Dimostra gli allineamenti della proteina che sono basati su analisi microarray delle interazioni dell'antigene-anticorpo. Gli antigeni sono macchiati sulle lastre di vetro. Anticorpi che sono legatura etichettata agli antigeni ed emettono il segnale fluorescente (indicato come la stella gialla) quale può allora essere rilevato dal punto sull'allineamento.
b) Mostra un microarray della proteina composto di punti quale atto come immunoassays del panino. Gli anticorpi sono macchiati sui circuiti integrati ed il lysate delle cellule o una soluzione è applicato allo scorrevole. Gli anticorpi sono incubati con la soluzione, con il lavaggio successivo per rimuovere il grippaggio di non-specifico. I complessi del panino formati emettono un segnale rilevabile dal punto.
c) Una proteina di interazione della proteina-proteina microarray dove le proteine sono macchiate su un circuito integrato della proteina e le proteine identificate sono aggiunte al circuito integrato e sono incubate per determinare dove possono legarsi ed interagirsi. Un segnale rilevabile è emesso dai punti obbligatori.
d) Allineamento nucleico di interazione della Acido-proteina, (qui un circuito integrato di interazione della DNA-PROTEINA). Gli acidi nucleici quale DNA sono macchiati su una lastra di vetro. Ciò ha potuto essere luoghi obbligatori di transcriptional per esempio. Le proteine quali i fattori DNA-LEGANTESI fluorescently identificati della trascrizione in soluzione sono aggiunte al circuito integrato e sono incubate sull'allineamento. Un segnale rilevabile è emesso dai punti del DNA in cui le proteine si legano.
e) Se vi fate un insieme desiderare i ligands e trovare i ricevitori la legatura a, potete usare un circuito integrato della proteina del ricevitore-ligand come visualizzato. Le proteine del ricevitore sono macchiate sulle lastre di vetro. I ligands identificati Fluorescently sono aggiunti al circuito integrato. Legandosi del ligand ai ricevitori causa l'emissione di un segnale rilevabile che segna i punti con esattezza d'interazione (cioè che la proteina ha fatto la legatura del ligand).
la f) alla prova per la specificità una dell'enzima-subrates può impiegare una proteina di enzima-substrato microarray. Questo circuito integrato si compone di nano-pozzi del descrete in cui gli enzimi sono limitati. Il substrato è aggiunto nei nano-pozzi e l'emissione del segnale è rilevata dai nano-pozzi per analizzare per la funzione degli enzimi.
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