Microarrays de protéine
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Puces de protéine :
Des Microarrays de protéine peuvent être basés sur n'importe quelle analyse ligand-contraignante qui se fonde sur la formation du produit avec une molécule immobilisée de saisie et une molécule de cible actuelles dans la solution. Ces analyses peuvent miniturized et placées sur une puce de microarray de protéine.
Les microarrays de protéine deviennent maintenant dus très populaire à leurs futures applications possibles dans l'étude de l'acide-protéine nucléique, de la protéine-protéine, du ligand-récepteur, de la cible de drogue-protéine, et des interactions d'enzyme/substrate.
Types de molécules de saisie pour des puces de Microarray de protéine. Pour analyser des interactions de protéine avec d'autres molécules, les microarrays de protéine peuvent avoir de divers types de molécules immobilisées sur la surface de glissière pour agir en tant que des molécules de saisie dans l'analyse de microarray de protéine.

Le schéma 1 montre l'alignement de protéine le plus commun, le microarray d'anticorps. Des anticorps sont repérés sur une plaque en verre. Deux lysates de cellules avec des protéines étiquetées avec Cy3 et Cy5 (par exemple, cancer contre la normale) sont ajoutés comme solution sur l'alignement de protéine. Des signaux sont détectés des deux signaux différents. Des données sont calculées en permettant une analyse de combien teindre-a étiqueté la protéine que les anticorps sur chaque tache lient. Cette information permet à on de déterminer si l'expression de protéine vers le haut-est réglée dans le cancer, vers le bas-réglé ou sans changement.
Le schéma 2. a) explique les alignements de protéine qui sont basés sur l'analyse de microarray des interactions d'antigène-anticorps. Des antigènes sont repérés sur des plaques en verre. Anticorps qui sont grippage étiqueté aux antigènes et émettent le signal fluorescent (affiché comme l'étoile jaune) ce qui peut alors être détecté de la tache sur l'alignement.
b) Affiche un microarray de protéine composé de taches ce qui agissent en tant qu'immunoessais de sandwich. Des anticorps sont repérés sur les puces et le lysate de cellules ou une solution est appliqué à la glissière. Des anticorps sont incubés avec la solution, avec le lavage postérieur pour retirer l'attache non spécifique. Les complexes de sandwich formés émettent un signal discernable de la tache.
c) Un microarray de protéine d'interaction de protéine-protéine où des protéines sont repérées sur une puce de protéine, et des protéines étiquetées sont ajoutés à la puce et incubés pour déterminer où ils peuvent lier et agir l'un sur l'autre. Un signal discernable est émis des taches obligatoires.
d) Alignement nucléique d'interaction d'Acide-protéine, (ici une puce d'interaction d'ADN-protéine). Des acides nucléiques tels que l'ADN sont repérés sur une plaque en verre. Ceci a pu être les accepteurs transcriptional par exemple. Des protéines telles que des facteurs ADN-contraignants fluorescent étiquetés de transcription sont ajoutées à la puce et en solution incubées sur l'alignement. Un signal discernable est émis des taches d'ADN où les protéines lient.
e) Si vous faites vouloir un ensemble de ligands et de vous trouver les récepteurs le grippage à, vous pouvez utiliser une puce de protéine de récepteur-ligand comme affichée. Des protéines réceptrices sont repérées sur des plaques en verre. Des ligands fluorescent étiquetés sont ajoutés à la puce. Lier du ligand aux récepteurs entraîne l'émission d'un signal discernable qui indique exactement les taches de interaction (c.-à-d. que la protéine a fait le grippage de ligand).
f) Pour déterminer la spécificité une d'enzyme-subrates peut utiliser un microarray de protéine d'enzyme/substrate. Cette puce se compose de nano-puits de descrete dans lesquels des enzymes sont liées. Le substrat est ajouté dans les nano-puits et l'émission de signal est détectée des nano-puits afin d'analyser pour la fonction d'enzymes.
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