Protéine Microarrays
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Puces de Protéine :
La protéine Microarrays peut être basée sur n'importe quelle analyse ligand-liante qui se fonde sur la formation du produit avec une molécule immobilisée de saisie et une molécule de cible actuelles dans la solution. Ces analyses peuvent être miniturized et ont placé sur une puce microarray de protéine.
Les microarrays de protéine deviennent maintenant dus très populaire à leurs futures applications possibles dans l'étude de l'acide-protéine, de la protéine-protéine, du ligand-récepteur, de la cible de drogue-protéine, et des interactions nucléiques d'enzyme/substrate.
Types de molécules de saisie pour des puces de Microarray de protéine. Pour analyser des interactions de protéine avec d'autres molécules, les microarrays de protéine peuvent avoir de divers types de molécules immobilisées sur la surface de glissière pour agir en tant que molécules de saisie dans l'analyse microarray de protéine.
Le schéma 1 illustre l'alignement de protéine le plus commun, l'anticorps microarray. Des anticorps sont repèrés sur une plaque en verre. Deux lysates de cellules avec des protéines étiquetées avec Cy3 et Cy5 (par exemple, cancer contre la normale) sont ajoutés comme solution sur l'alignement de protéine. Des signaux sont détectés des deux signaux différents. Des données sont calculées en permettant une analyse de combien teindre-a étiqueté la protéine que les anticorps sur chaque tache lient. Cette information permet à on de déterminer si l'expression de protéine vers le haut-est réglée dans le cancer, vers le bas-réglé ou sans changement.
Le schéma 2. a) Démontre les alignements de protéine qui sont basés sur l'analyse microarray des interactions d'antigène-anticorps. Des antigènes sont repèrés sur des plaques en verre. Anticorps qui sont grippage étiqueté aux antigènes et émettent le signal fluorescent (montré pendant que le jaune tiennent le premier rôle) ce qui peut alors être détecté de la tache sur l'alignement.
b) Montre un microarray de protéine composé de taches quel agir comme des immunoassays de sandwich. Des anticorps sont repèrés sur les puces et le lysate de cellules ou une solution est appliqué à la glissière. Des anticorps sont incubés avec la solution, avec le lavage postérieur pour retirer l'attache non spécifique. Les complexes de sandwich formés émettent un signal discernable de la tache.
c) Une protéine d'interaction de protéine-protéine microarray où des protéines sont repèrées sur une puce de protéine, et des protéines étiquetées sont ajoutées à la puce et incubées pour déterminer où elles peuvent lier et agir l'un sur l'autre. Un signal discernable est émis des taches obligatoires.
d) Alignement nucléique d'interaction d'Acide-protéine, (ici une puce d'interaction d'ADN-PROTÉINE). Des acides nucléiques tels que l'ADN sont repèrés sur une plaque en verre. Ceci a pu être les accepteurs de transcriptional par exemple. Des protéines telles que des facteurs ADN-LIANTS fluorescently étiquetés de transcription en solution sont ajoutées à la puce et incubées sur l'alignement. Un signal discernable est émis des taches d'ADN où les protéines lient.
e) Si vous faites vouloir un ensemble de ligands et de vous trouver les récepteurs le grippage à, vous pouvez utiliser une puce de protéine de récepteur-ligand comme affichée. Des protéines de récepteur sont repèrées sur des plaques en verre. Des ligands étiquetés par Fluorescently sont ajoutés à la puce. Lier du ligand aux récepteurs cause l'émission d'un signal discernable qui indique exactement les taches agissantes l'un sur l'autre (c.-à-d. que la protéine a fait le grippage de ligand).
f) Déterminer la spécificité une d'enzyme-subrates peut utiliser une protéine d'enzyme/substrate microarray. Cette puce se compose de descrete nano-wells dans lequel des enzymes sont liées. Le substrat est ajouté dans le nano-wells et l'émission de signal est détectée du nano-wells afin d'analyser pour la fonction d'enzymes.
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