Protein Microarrays Протеин Microarrays
Visit Molecular Station for a great article on Antibody and Protein Microarrays Посетете молекулярна станция за голяма статия на антитела и протеини Microarrays
Protein Chips: Протеин Чипове:
Protein Microarrays can be based on any ligand-binding assay that relies on the formation of product with an immobilized capture molecule and a target molecule present in the solution. Протеин Microarrays може да се основава на всички лиганд-задължителен тест, че разчита на създаването на продукт с имобилизиран за улавяне на молекулата и целеви молекула присъства в разтвора. These assays can be miniturized and placed on a protein microarray chip. Тези тестове могат да бъдат miniturized и пуснати на протеин microarray чип.
Protein microarrays are now becoming very popular due to their possible future applications in the study of nucleic acid-protein, protein-protein, ligand-receptor, drug-protein target, and enzyme-substrate interactions. Протеин microarrays сега стават много популярни поради тяхната възможни бъдещи приложения в изследване на Нуклеинова киселина-белтък, протеин-протеин, лиганд-рецептори, с употребата на наркотици, протеини, целеви и ензим-субстрат взаимодействия.
Types of Capture Molecules for Protein Microarray Chips. Видове снемането молекули за протеинови Microarray Чипове. To analyze protein interactions with other molecules, protein microarrays can have various types of molecules immobilized on the slide surface to act as capture molecules in the protein microarray assay. Да анализира протеин, взаимодействие с други молекули, протеин microarrays може да има различни видове молекули движение по повърхността на слайда да действа като за улавяне на молекули в протеин microarray тест.
Figure 1 Illustrates the most common protein array, the antibody microarray. Фигура 1 илюстрира най-честите протеин масив, на антитела microarray. Antibodies are spotted onto a glass slide. Антитела са завари в чаша пързалка. Two cell lysates with proteins labeled with Cy3 and Cy5 (for example, cancer vs normal) are added as a solution onto the protein array. Две клетки lysates с протеини, означени с Cy3 и Cy5 (например, срещу рак на нормалното), се добавят като разтвор към протеини масив. Signals are detected from the two different signals. Сигналите са открити от два различни сигнали. Data is computed allowing an analysis of how much dye-labeled protein the antibodies on each spot are binding. Данните са изчислени позволява анализ на начина, по-боядисване с надпис на антитела срещу протеин, за всеки място са задължителни. This information allows one to determine whether the protein expression is up-regulated in cancer, down-regulated or unchanged. Тази информация позволява да се определи дали протеин словото е най-регулираните в рак, предвидена-регулиран или непроменени.
Figure 2. Фигура 2. a) Demonstrates protein arrays which are based on microarray analysis of antigen-antibody interactions. а) протеин показва масиви, които са основани на анализ на microarray антиген-антитяло взаимодействия. Antigens are spotted onto glass slides. Антигени са петниста върху стъкло пързалки. Antibodies which are tagged bind to antigens and emit fluorescent signal (shown as the yellow star) which can then be detected from the spot on the array. Антитела, които са маркирани с името антигени и флуоресцентни излъчват сигнал (както е показано на жълтата звезда), които могат да бъдат открити от място на масив.
b) Shows a protein microarray composed of spots which act as sandwich immunoassays. б) показва microarray протеин, съставен от петна, които действат като сандвич immunoassays. Antibodies are spotted onto the chips and cell lysate or a solution is applied to the slide. Антитела са петниста към клетъчни чипове и lysate или решение се прилага към слайда. Antibodies are incubated with the solution, with later washing to remove non-specific binding. Антитела са инкубирани с решение, с пране по-късно за отстраняване на не-конкретни задължителни. The sandwich complexes formed emit a detectable signal from the spot. В сандвич комплекси, формирани отделят един от откриване на сигнала на място.
c) A protein-protein interaction protein microarray where proteins are spotted onto a protein chip, and labeled proteins are added to the chip and incubated to determine where they may bind and interact. в) протеин-протеин взаимодействие microarray протеин, протеини, когато са петниста върху протеин чип, както и с надпис белтъци се прибавят към чип и инкубатор за да се определи, където те могат да свързват и взаимодействат. A detectable signal is emitted from binding spots. А открие сигнала е излъчен от задължителни точки.
d) Nucleic Acid-protein interaction array, (here a DNA-protein interaction chip). г) Нуклеинова киселина-белтък взаимодействие масив, (тук на ДНК-чип взаимодействие протеин). Nucleic acids such as DNA are spotted onto a glass slide. Нуклеинова киселини, като ДНК, са завари в чаша пързалка. This could be transcriptional binding sites for example. Proteins such as fluorescently labeled DNA-binding transcription factors in solution are added to the chip and incubated on the array. Това би могло да бъде задължителен transcriptional сайтове, например. Протеини като fluorescently означени с ДНК-обвързващ транскрипция фактори в разтвор се добавя към чип и инкубатор на масив. A detectable signal is emitted from the DNA spots where the proteins bind. А открие сигнала е излъчен от ДНК места, където името на протеини.
e) If you have a set of ligands and you want to find the receptors the bind to, you can use a receptor-ligand protein chip as displayed. Receptor proteins are spotted on glass slides. д) Ако имате набор от лиганди и искате да намерите на рецепторите за да се обвърже, можете да използвате рецепторен лиганд-протеин, чип, както на екрана. рецепторни протеини са петниста на стъкло пързалки. Fluorescently labeled ligands are added to the chip. Fluorescently надписани лиганди са добавени към чип. Binding of ligand to receptors causes the emission of a detectable signal which pinpoints the interacting spots (ie which protein did the ligand bind to). Свързването на лиганд с рецепторите води на емисиите на сигнала, който се открива pinpoints на взаимодействие петна (т.е. протеин, който пък се свързват с лиганд).
f) To test for enzyme-subrates specificity one can employ an enzyme-substrate protein microarray. е) тест за ензим-subrates специфика може да се наемат един ензим-субстрат протеин microarray. This chip is composed of descrete nano-wells in which enzymes are bound. Този чип се състои от descrete нано-кладенци, в които са обвързани ензими. Substrate is added into the nano-wells and signal emission is detected from the nano-wells in order to assay for enzyme function. Субстрат се добавя в нано-и кладенци сигнал за емисии е открита от нано-кладенци с цел изследване на ензима функция.
&nbs�ÊM:p> & nbsÊM: п>
![[أربيك]](http://www.microarraystation.com/translate/images/flag_ar.gif){kind=small}
